1. Formål: Denne procedure har til formål at tilvejebringe en standardiseret procedure for aseptiske operationer og beskyttelse af sterile rum.
2. Anvendelsesområde: biologisk testlaboratorium
3. Ansvarlig person: QC Supervisor Tester
4. Definition: Ingen
5. Sikkerhedsforanstaltninger
Udfør strengt aseptiske operationer for at forhindre mikrobiel kontaminering; operatører skal slukke UV-lampen, før de går ind i det sterile rum.
6. Procedurer
6.1. Det sterile rum skal være udstyret med et sterilt operationsrum og et bufferrum. Renligheden af det sterile operationsrum skal nå klasse 10000. Indetemperaturen skal opretholdes på 20-24°C, og luftfugtigheden skal opretholdes på 45-60%. Renligheden af den rene arbejdsbænk skal nå klasse 100.
6.2. Sterile rum skal holdes rene, og det er strengt forbudt at ophobe affald for at forhindre kontaminering.
6.3. Undgå strengt kontaminering af alt steriliseringsudstyr og kulturmedier. Personer, der er kontaminerede, bør stoppe med at bruge dem.
6.4. Sterile rum skal være udstyret med desinfektionsmidler i arbejdskoncentration, såsom 5% kresolopløsning, 70% alkohol, 0,1% chlormethioninopløsning osv.
6.5. Sterilrummet skal steriliseres regelmæssigt og rengøres med passende desinfektionsmiddel for at sikre, at det sterile rums renlighed opfylder kravene.
6.6. Alle instrumenter, beholdere, skåle og andre genstande, der skal bringes ind i et sterilt rum, skal være tæt indpakket og steriliseret med passende metoder.
6.7. Før personalet går ind i det sterile rum, skal de vaske hænder med sæbe eller desinfektionsmiddel og derefter skifte til særligt arbejdstøj, sko, hatte, masker og handsker i bufferrummet (eller tørre hænderne af igen med 70% ethanol), før de går ind i det sterile rum. Udfør operationerne i bakteriekammeret.
6.8. Før brug af det sterile rum skal den ultraviolette lampe i det sterile rum være tændt for bestråling og sterilisering i mere end 30 minutter, og den rene bænke skal være tændt for luftblæsning samtidig. Efter operationen er afsluttet, skal det sterile rum rengøres i tide og derefter steriliseres med ultraviolet lys i 20 minutter.
6.9. Før inspektion skal den ydre emballage til testprøven holdes intakt og må ikke åbnes for at forhindre kontaminering. Før inspektion skal den ydre overflade desinficeres med vatrondeller med 70% alkohol.
6.10. Under hver operation bør der udføres en negativ kontrol for at kontrollere pålideligheden af den aseptiske operation.
6.11. Når du absorberer bakterievæske, skal du bruge en sugekugle til at absorbere den. Rør ikke sugerøret direkte med munden.
6.12. Inokuleringsnålen skal steriliseres med flamme før og efter hver brug. Efter afkøling kan kulturen inokuleres.
6.13. Sugerør, reagensglas, petriskåle og andet redskab, der indeholder bakterievæske, skal lægges i blød i en steriliseringsspand med en 5% lysolopløsning til desinfektion og tages ud og skylles efter 24 timer.
6.14. Hvis der spildes bakterievæske på et bord eller gulv, skal du straks hælde en 5% carbolsyreopløsning eller 3% lysol på det forurenede område i mindst 30 minutter, før det behandles. Når arbejdstøj og hatte er forurenet med bakterievæske, skal de straks tages af og vaskes efter højtryksdampsterilisering.
6.15. Alle genstande, der indeholder levende bakterier, skal desinficeres, inden de skylles under vandhanen. Det er strengt forbudt at forurene kloakken.
6.16. Antallet af kolonier i det sterile rum bør kontrolleres månedligt. Med den rene bænke åben, tag et antal sterile petriskåle med en indre diameter på 90 mm, og injicér aseptisk ca. 15 ml næringsagarkulturmedium, der er smeltet og afkølet til ca. 45 °C. Efter størkning placeres de på hovedet ved 30 til 35 °C. Inkuber i 48 timer i en inkubator på ℃. Efter at have bevist steriliteten, tag 3 til 5 plader og placer dem i venstre, midterste og højre side af arbejdspositionen. Efter at have åbnet låget og eksponeret dem i 30 minutter, placeres de på hovedet i en inkubator på 30 til 35 °C i 48 timer, og tag dem ud. Undersøg. Det gennemsnitlige antal diverse bakterier på pladen i et rent område af klasse 100 må ikke overstige 1 koloni, og det gennemsnitlige antal i et rent rum af klasse 10000 må ikke overstige 3 kolonier. Hvis grænsen overskrides, skal det sterile rum desinficeres grundigt, indtil gentagne inspektioner opfylder kravene.
7. Se kapitlet (Sterilitetsinspektionsmetode) i "Metoder til lægemiddelhygiejnisk inspektion" og "Kinas standardpraksis for lægemiddelinspektion".
8. Distributionsafdeling: Kvalitetsstyringsafdeling
Teknisk vejledning til renrum:
Efter at have opnået et sterilt miljø og sterile materialer, skal vi opretholde en steril tilstand for at kunne studere en specifik kendt mikroorganisme eller udnytte dens funktioner. Ellers kan forskellige mikroorganismer udefra let blandes ind. Fænomenet med blanding af irrelevante mikroorganismer udefra kaldes kontaminerende bakterier i mikrobiologi. Forebyggelse af kontaminering er en kritisk teknik i mikrobiologisk arbejde. Fuldstændig sterilisering på den ene side og forebyggelse af kontaminering på den anden side er to aspekter af aseptisk teknik. Derudover skal vi forhindre de mikroorganismer, der undersøges, især patogene mikroorganismer eller genetisk modificerede mikroorganismer, der ikke findes i naturen, i at slippe ud fra vores forsøgsbeholdere til det eksterne miljø. Til disse formål er der i mikrobiologi mange foranstaltninger.
Et sterilt rum er normalt et lille rum, der er specielt indrettet til et mikrobiologisk laboratorium. Det kan bygges med plader og glas. Området bør ikke være for stort, omkring 4-5 kvadratmeter, og højden bør være omkring 2,5 meter. Der bør oprettes et bufferrum uden for sterilrummet. Døren til bufferrummet og døren til det sterile rum bør ikke vende i samme retning for at forhindre luftstrømmen i at bringe diverse bakterier ind. Både sterilrummet og bufferrummet skal være lufttætte. Indendørs ventilationsudstyr skal have luftfiltreringsanordninger. Gulvet og væggene i det sterile rum skal være glatte, vanskelige at indeholde snavs og lette at rengøre. Arbejdsfladen skal være plan. Både sterilrummet og bufferrummet er udstyret med ultraviolet lys. De ultraviolette lys i det sterile rum er 1 meter væk fra arbejdsfladen. Personale, der går ind i det sterile rum, skal bære sterilt tøj og hatte.
I øjeblikket findes sterile rum hovedsageligt i mikrobiologifabrikker, mens generelle laboratorier bruger rene arbejdsbænke. Hovedfunktionen af renbænken er at bruge en laminar luftstrømningsenhed til at fjerne forskellige små støvpartikler, herunder mikroorganismer, fra arbejdsoverfladen. Den elektriske enhed tillader luft at passere gennem HEPA-filteret og derefter trænge ind i arbejdsoverfladen, så arbejdsoverfladen altid holdes under kontrol af den strømmende sterile luft. Derudover er der et højhastighedsluftgardin på siden tæt på ydersiden for at forhindre udefrakommende bakteriel luft i at trænge ind.
På steder med vanskelige forhold kan sterile trækasser også bruges i stedet for en ren arbejdsplads. Sterilkassen har en enkel struktur og er nem at flytte. Der er to huller på forsiden af kassen, som er blokeret af push-pull-døre, når den ikke er i brug. Du kan strække armene ind under drift. Den øverste del af fronten er udstyret med glas for at lette den indvendige betjening. Der er en ultraviolet lampe inde i kassen, og redskaber og bakterier kan kommes ind gennem en lille dør på siden.
Aseptiske operationsteknikker spiller i øjeblikket ikke kun en central rolle i mikrobiologisk forskning og anvendelser, men anvendes også i vid udstrækning i mange bioteknologier. For eksempel transgen teknologi, monoklonal antistofteknologi osv.
Opslagstidspunkt: 6. marts 2024